近日,欧易生物合作客户中国科学院上海营养与健康研究所冯英研究组合作在先进科学(IF 16.806)发表通过单细胞转录组测序揭示Myf5衍生细胞的异质性以及其缺失SRSF2后肌源性命运改变的相关结果,郭若晨博士为文章***作者,上海营养与健康研究所冯英研究员,济宁医学院出生缺陷研究与转化协同创新中心陈瑞蛟研究员为该论文的共同通讯作者。欧易生物提供了该项目的单细胞转录组测序和分析,文章特别致谢了欧易生物巴永兵和李炼在单细胞分析中提供的帮助。结合空间转录组测序技术,作者进一步确定和丰富了胚胎心脏基因表达的空间注释信息。辽宁欧易生物空间转录组价格
空间转录组的一般流程。将准备好的新鲜冷冻组织切片放置于空间转录组芯片上。每个细胞中的RNA分子都包含着基因表达的信息。组织切片成像,以检索组织学信息。这样就可以看到一个细胞或一组细胞在组织中的位置。空间转录组芯片上含有上千个捕获的spot,这些捕获探针的 Poly-T 尾可以结合RNA分子的 Poly-A 尾。这些阵列的排列顺序就像一个棋盘,带有相同身份条形码(barcode)的探测位于同一个正方形中。这样就可以确定每个捕获探针及其结合RNA的来源。组织切片固定。该芯片包含一个与组织切片一起成像的视觉可检测框架。黑龙江欧易生物空间转录组质量空间转录组测序结果为未来人类心脏发育的研究提供重要的借鉴意义。
转录本的空间位置信息可以通过在原位阵列上捕获的组织切片中的转录本来获取,目前已有多种技术策略被开发报道,如空间转录组技术(SpatialTranscriptomics,ST)和Visium技术,通过将包含空间位置信息的条形码、UMI标签、poly-dT的探针固定在商用微阵列载玻片上,来捕获包含poly(A)尾巴的转录本,**终获取全转录组水平的基因表达及位置信息。在Slide-Seq中,探针通过微液滴将混合组合标签、UMI标签和poly-dT置于单层载玻片上,而在HDST中,探针被置于载玻片上蚀刻的孔中。在DBiT-seq中,则通过微流体通道生成空间阵列,微通道用于在一个方向上提供一种类型的标签,然后在垂直方向上提供另一种类型的标签,形成正交连接通道,以便可以通过***的成对组合标签识别每个斑点位置。
空间转录组(Spatial Transcriptomics)就是将基因的表达情况与关注的组织切片的免疫化学染色图像进行整合,从而将组织内不同细胞的基因表达信息定位到组织的原始空间位置上去,进而直接观测组织中不同部位功能区基因表达的差异。空间转录组技术利用了常规的原位技术和组学技术两方面的优势。目前已发表的关于空间转录组技术有主要有 Spatial Transcriptomics, Slide-seq, LCM-seq, seqFISH, MERFISH, Liver single cell zonation, Geo-seq 和 Tomo-seq, 涉及物种有人、小鼠、果蝇、秀丽隐杆线虫、斑马鱼、拟南芥、杨树和云杉等。空间转录组使得在mRNA样品处理和后续测序过程中位置信息的编码和获取成为可能。
广义上来说,目前一共有4种解析“空间性转录组”的策略:2.第一种是利用计算机算法,根据单细胞转录组数据来模拟重构组织的空间形态。例如Seurat,这是一个在单细胞数据分析中***用到的R包,我们可以利用scRNA-seq数据,加上对markegene进行原位测序的结果来重构组织的空间信息。3.第二种,激光显微切割+二代测序(LCM+NGS)。这种技术对仪器和实验人员的操作要求较高,而且获取的通量也比较低,如果组织非常珍贵或者研究的内容十分精细,可以考虑这个。但是这种策略比较难被官方干运用。4.第三种策略,就是基于高分辨图像的原位测序。**经典的是smFISH当然,这种方法的通量比较低。当然随着技术的发现,刚发布的FISH-seq技术通过多轮杂交的方式,已经把测序通量提高到了10000+个转录本。5.***就是“基于空间条形码(spatialbarcodes)的空间转录组技术。本文主要讨论的也就是这种技术。后面主要讨论的都是基于这种策略。 空间转录组学技术主要包括 MERFISH 和 seqFISH。江苏欧易生物空间转录组是什么
10x Genomics公司宣布了新一代FFPE空间转录组商业化解决方案。辽宁欧易生物空间转录组价格
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